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生物知識(shí)

酶標(biāo)儀測定原理是

作者: 來源: 發(fā)布時(shí)間: 2009-12-29 15:38  瀏覽次數(shù):
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酶標(biāo)儀主要應(yīng)用于酶聯(lián)免疫吸附檢測反應(yīng)中檢測吸光度值,其用途主要應(yīng)用于ELISA試劑的測定,廣泛用于各種實(shí)驗(yàn)室,包括臨床實(shí)驗(yàn)室。

酶標(biāo)儀測定原理是:在特定波長下,檢測被測物的吸光值。

檢測單位:
光通過被檢測物,前后的能量差異即是被檢測物吸收掉的能量,特定波長下,同一種被檢測物的濃度與被吸收的能量成定量關(guān)系。
檢測單位用OD值表示, OD是optical delnsity(光密度)的縮寫,表示被檢測物吸收掉的光密度, OD=1og(1/trans),其中trans為檢測物的透光值。根據(jù)Bouger-amberT-beer法則,OD值與光強(qiáng)度成下述關(guān)系:
E=OD=logΙ0/Ι其中E表示被吸收的光密度, Ι0 為在檢測物之前的光強(qiáng)度,Ι為從被檢測物出來的光強(qiáng)度。
OD值由下述公式計(jì)算:
E=OD=C×D×E
C為檢測物的濃度
D為檢測物的厚度
E為摩爾因子
在特定波長下測定每一種物質(zhì)都有其特定的波長,在此波長下,此物質(zhì)能夠吸收最多的光能量。如果選擇其它的波長段,就會(huì)造成檢測結(jié)果的不準(zhǔn)確。因此,在測定檢測物時(shí),我們選擇特定的波長進(jìn)行檢測,稱為測量波
長。
但是每一種物質(zhì)對光能量還存在一定的非特異性吸收,為了消除這種非特異性吸收,我們再選取一個(gè)參照波長,以消除這個(gè)不準(zhǔn)確性。在參照波長下,檢測物光的吸收最小。檢測波長和參照波長的吸光值之差可以消除非特異性吸收。

一般使用到酶標(biāo)儀的主要是在食品安全藥物殘留快速檢測中,例如配合北京望爾生物技術(shù)有限公司的克倫特羅、氯霉素、呋喃唑酮、呋喃它酮、呋喃妥因、磺胺類、氟喹諾酮類、鏈霉素、青霉素等殘留快速檢測

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