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| 購買進(jìn)口儀器、試劑和耗材——就在始于2001年的畢特博生物 www.mobfastly.com |
1.Clonetics原代細(xì)胞及培養(yǎng)基系統(tǒng) （點擊標(biāo)題進(jìn)入） 2.Lonza Clonetics原代細(xì)胞培養(yǎng)基 （點擊標(biāo)題進(jìn)入）
CloneticsTM 培養(yǎng)基系統(tǒng)（CloneticsTM Media Systems）
培養(yǎng)基說明
CloneticsTM培養(yǎng)基系統(tǒng)是為了使某些特定的正常人體細(xì)胞獲得最佳的生長狀態(tài)而合成的。可以購買不含添加劑的基礎(chǔ)培養(yǎng)基，也可購買完全培養(yǎng)基，或者便于使用者控制添加劑的種類和濃度的BulleKits方便包裝。每種培養(yǎng)基均檢測了其維持正常人體細(xì)胞生長的的能力。每批培養(yǎng)基均經(jīng)過生化和無菌檢測。
基礎(chǔ)培養(yǎng)基
基礎(chǔ)培養(yǎng)基配方已經(jīng)經(jīng)過優(yōu)化使之適合于某些特定類型的正常人體細(xì)胞的培養(yǎng)，不含細(xì)胞增殖所必需生長因子。因此必需添加生長因子以加強(qiáng)細(xì)胞的接種效率和促進(jìn)細(xì)胞的增殖。
完全培養(yǎng)基
完全培養(yǎng)基是含各種添加劑的生長培養(yǎng)基（BPE和BBE分別各自包裝），含有特定類型正常人體細(xì)胞增殖所必須的各種生長因子和添加劑。盡量避免加入成分不確定的添加劑，即便必需也僅使用最小量。所有生長培養(yǎng)基的標(biāo)準(zhǔn)配方都包括抗生素，特殊要求情況下也提供不含抗生素的培養(yǎng)基。
BulletKits
BulletKits提供靈活的終培養(yǎng)基配方及更長的保存期。每個BulletKit含有基礎(chǔ)培養(yǎng)基，已預(yù)先測定的專一用途的aliquots(SingleQuots)生長因子和抗生素，便于您根據(jù)自己的選擇配置生長培養(yǎng)基。
培養(yǎng)基的制備（Media Preparation）---在無菌環(huán)境中執(zhí)行下列操作。
配制一瓶含各種添加劑的培養(yǎng)基，操作如下：
1， 加BBE或BPE (如需要) 于500ml的基礎(chǔ)培養(yǎng)基瓶中
A,從培養(yǎng)基中分離BBE或BPE添加劑。
B,用乙醇或異丙醇擦凈小瓶和培養(yǎng)基瓶。
C,用吸管將瓶中所有的內(nèi)容物 (大約2ml) 加入培養(yǎng)基中。用培養(yǎng)基沖洗盛裝BBE的小瓶再將洗液移回500ml瓶中。
D,蓋上蓋子，輕輕地旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)基幾次使之混合。
E,在培養(yǎng)基標(biāo)簽上標(biāo)記好BBE或BPE的加入日期。
BulletKits,遵循以下步驟：
1, 用乙醇或異丙醇擦凈SingleQuots 冷凍小瓶和基礎(chǔ)培養(yǎng)基瓶外表面。
2, 無菌條件下打開冷凍小瓶，用吸管將冷凍小瓶中全部內(nèi)含物加入基礎(chǔ)培養(yǎng)基中。
3, 用培養(yǎng)基清晰每個冷凍小瓶，再將洗液倒回基礎(chǔ)培養(yǎng)基瓶中。要完全達(dá)到標(biāo)示的體積是不太可能的，少量的丟失，即使達(dá)到10%通常不會影響含添加劑培養(yǎng)基的細(xì)胞生長特性。
4, 我們建議您將試劑盒提供的標(biāo)簽貼到已加油添加劑的原基礎(chǔ)培養(yǎng)基瓶上，并覆蓋原基礎(chǔ)培養(yǎng)基瓶的標(biāo)簽，用它來記錄加入的每種添加劑的數(shù)量及日期，這樣可避免混淆和可能得雙倍添加。
5, 根據(jù)貯藏期限在標(biāo)簽上注明有效期。完全重新配制的BulletKits 有效期為30天。這種含添加劑的培養(yǎng)基即可以當(dāng)作一種生長培養(yǎng)基。
注意：考慮到在補(bǔ)充添加劑的過程中可能導(dǎo)致污染，為了確保無菌，整個新配制的生長培養(yǎng)基可能需要使用0.2微米的濾膜重新過濾。由于每次濾過可能導(dǎo)致某些蛋白的丟失，因此我們并不推薦定期的重新濾過。
開始之前---在準(zhǔn)備培養(yǎng)基和細(xì)胞以前，請遵循以下步驟：
1, 準(zhǔn)備一個無菌場地
無菌場地內(nèi)備有一個帶前置存放開口和濾過層流 級生物安全柜或一個等同的裝置。
2, 決定所需的培養(yǎng)基量
請參閱“常規(guī)塑料器皿生長面積表”以此來決定所需的培養(yǎng)基量。
3, 所需的無菌器械和器皿
Ø 無菌可處理的血清學(xué)吸液管
Ø 微量移液器和無菌Tips
Ø 可調(diào)多通道移液器或重復(fù)使用的移液器
Ø 與多通道移液器配合使用的無菌容器
Ø 15ml無菌離心管
Ø 細(xì)胞培養(yǎng)瓶
Ø 多孔、平底組織培養(yǎng)板
Ø 血細(xì)胞計數(shù)儀貨細(xì)胞計數(shù)器
4, 其他所需物品：
Ø 70%酒精（乙醇或異丙醇）
Ø 生長培養(yǎng)基（細(xì)胞類型特異性的）
Ø 防護(hù)手套和外套
Ø 臺盼藍(lán)
5, 為初始實驗的實施作計劃和準(zhǔn)備
依據(jù)產(chǎn)品附帶的分析證書上表明的細(xì)胞數(shù)為依據(jù)確定實驗的實施。
6, 核對培養(yǎng)箱的標(biāo)度。培養(yǎng)箱內(nèi)應(yīng)保持一定的濕度并設(shè)定為37℃，5%CO2和95%空氣。
相關(guān)英文信息如下：
-------引自Clonetics® Endothelial Cell Systems (Instructions for Use)
Unpacking and Storage Instructions
4. BulletKit® Instructions: Upon arrival, store Basal Medium at 4-8°C and SingleQuots® at -20°C in a freezer that is not self-defrosting. If thawed upon arrival, growth factors can be stored at 4°C and added to basal medium within 72 hours of receipt. After SingleQuots® are added to basal medium, use within one month. Do not re-freeze.
5. ReagentPack™ Subculture Reagents are sterile-filtered and then stored at -20°C until shipment. Subculture reagents may thaw during transport. They may be refrozen once. If you plan to use within 3 days, store at 4°C. Trypsin/EDTA Solution has a limited shelf life or activation at 4°C. If, upon arrival, Trypsin/EDTA is thawed, immediately aliquot and refreeze at –20°C. We recommend that the HEPES-BSS and the Trypsin Neutralizing Solution be stored at 4°C for no more than one month. Note: To keep Trypsin/EDTA fresh and active after thawing, you may aliquot it into sterile centrifuge tubes and re-freeze at -20°C.
Preparation of Medium（Perform the following steps in a sterile field. ）
For EGM® Complete, do the following:
1. Decontaminate the vial of BBE and medium bottle with ethanol or isopropanol.
2. Add the entire contents of the vial (approximately 2 ml) to the media with a pipette. Rinse the BBE vial with medium and pipette the contents back into the 500 ml bottle.
3. Replace the cap and swirl the medium gently a few times to mix.
4. Record the date the BBE was added on the medium label.
For a BulletKit®, perform the following steps:
1. Decontaminate the external surfaces of all supplement vials and the medium bottle with ethanol or isopropanol.
2. Aseptically open each supplement vial and add the entire amount to the basal medium with a pipette.
3. Rinse each cryovial with the medium. It may not be possible to recover the entire volume listed for each cryovial. Small losses, even up to 10%, should not affect the cell growth characteristics of the supplemented medium.
4. Transfer the label provided with each kit to the basal medium bottle being supplemented. Use it to record the date and amount of each supplement added. We recommend that you place the completed label over the basal medium label (Avoid covering the basal medium lot # and expiration date) to avoid confusion or possible double supplementation.
5. Record the new expiration date on the label based on the shelf life.
Note: If there is concern that sterility was compromised during the supplementation process, the entire newly prepared growth medium may be refiltered with a 0.2 μm filter to assure sterility. Routine refiltration is not recommended.
LONZA（原Cambrex、Biowhittaker）公司簡介：
美國Cambrex成立于1981年，是全球人類健康與生物科學(xué)產(chǎn)品最主要的供應(yīng)商，同時還是飼料添加劑的生產(chǎn)商和動物健康/農(nóng)業(yè)市場的媒介以及優(yōu)質(zhì)化學(xué)試劑的制造商。主要細(xì)胞生物學(xué)產(chǎn)品、分子生物學(xué)產(chǎn)品、內(nèi)毒素檢測試劑等。自2007年2月起，Cambrex Bioproducts作為瑞士LONZA公司旗下，保留原有的科研隊伍及專業(yè)人員，將以同樣的產(chǎn)品品質(zhì)、同樣的服務(wù)質(zhì)量繼續(xù)服務(wù)于廣大用戶！詳細(xì)產(chǎn)品信息如下：
Endotoxin Detection：內(nèi)毒素檢測產(chǎn)品 Endpoint Fluorescent Assay（PyroGene重組因子C分析） Gel Clot LAL Assays （膠凝法） Kinetic Turbidimetric LAL Assay （動力學(xué)濁度法） Endpoint Chromogenic LAL Assay（顯色終點分析法） Kinetic Chromogenic LAL Assay（動力學(xué)顯色法） Instrumentation & Software （設(shè)備、軟件） Accessory Products（LAL附屬產(chǎn)品） Research Products：科研產(chǎn)品
Cell Culture（細(xì)胞培養(yǎng)） Cell Analysis Stains（細(xì)胞污染分析） BioWhittaker® Classical Media（百威泰克基礎(chǔ)培養(yǎng)基） BioWhittaker® Specialty & Serum-free Media（百威泰克特殊&無血清培養(yǎng)基） BioWhittaker® Cell Culture Reagents（百威泰克細(xì)胞培養(yǎng)試劑） BioAssays：生物鑒定 Mycoplasma Detection & Removal（支原體檢測及祛除） Cell Health / Cell Function Assays（細(xì)胞活性、功能檢測） Luminescent Assay Accessories High Throughput Screening Assays G-Protein Coupled Receptors and G-Protein Receptor Expressing Cell Lines Electrophoresis and Gene Expression：電泳和基因表達(dá) Nucleic Acid Electrophoresis（核酸電泳） Protein Electrophoresis（蛋白電泳） Sequencing & Mutation Detection Products（測序&突變檢測產(chǎn)品） 1.Clonetics原代細(xì)胞及培養(yǎng)基系統(tǒng) （點擊標(biāo)題進(jìn)入） |
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