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慢性乙型肝炎患者血清內(nèi)毒素、IL-4、IL-18水平的變化 唐寶璋， 燕奎華， 游晶， 陳紅英，昆明醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院傳染科（云南省昆明市650032） 黃禮云，云南省文山州人民醫(yī)院（云南省文山市 663000） 莊林，昆明市第三人民醫(yī)院（云南省昆明市 650041） 項(xiàng)目負(fù)責(zé)人： 唐寶璋，昆明醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院傳染科（云南省昆明市650032）電話： 0871-5324888-2673 收稿日期： 2003-05-14 接受日期：2003-06-02
【摘要】目的：研究慢性乙型肝炎患者病程中血清內(nèi)毒素(LPS)、IL-4和IL-18水平的變化，探討他們?cè)诎l(fā)病中的作用。方法：采用鱟試劑基質(zhì)顯色法，檢測(cè)血清LPS； 用ELISA法檢測(cè)血清IL-4、IL-18，同時(shí)檢測(cè)ALT等生化指標(biāo)和五型肝炎病原學(xué)指標(biāo)， 慢性乙型肝炎35例，健康對(duì)照30名。結(jié)果： 血清LPS、IL-4和IL-18水平于慢性乙型肝炎活動(dòng)期及緩解期均顯著高于健康對(duì)照（t =2.656，P <0.01），活動(dòng)期明顯高于緩解期（t =2.650，P <0.01）， 活動(dòng)期三項(xiàng)指標(biāo)均呈正相關(guān)（t =2.672，P <0.01）。結(jié)論： 慢性乙型肝炎病程中內(nèi)毒素、IL-4和IL-18水平的變化及其相互調(diào)節(jié)，影響著慢性乙型肝炎發(fā)病和轉(zhuǎn)歸。
【引言】近年來內(nèi)毒素及細(xì)胞因子形成的免疫網(wǎng)絡(luò)在乙型肝炎(乙肝)發(fā)病機(jī)制中的研究越來越受到重視， 發(fā)現(xiàn)各型乙肝常有不同程度的內(nèi)毒素血癥，一些研究顯示免疫細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子形成的網(wǎng)絡(luò)在乙肝的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)歸中發(fā)揮著重要作用。新近發(fā)現(xiàn)的IL-18對(duì)乙肝發(fā)病也有影響[1]， 本文旨在對(duì)慢性乙型肝炎患者病程中血清內(nèi)毒素、IL-4、IL-18水平變化及其相互關(guān)系作一初步研究，以探討他們?cè)诎l(fā)病中的作用。 1 材料和方法 1.1 材料 全部35例均為住院患者。男30例，女5例，年齡11-78歲，平均39.9±15.6歲。診斷按1995年(北京)第五次全國傳染病與寄生蟲病學(xué)術(shù)會(huì)議修訂的病毒性肝炎標(biāo)準(zhǔn)，35例慢性乙型肝炎中，輕度8例，中度17例，重度10例，并設(shè)健康人30名為正常對(duì)照。 1.2 方法 全部患者入院后抽取晨間空腹靜脈血3 mL，2 h內(nèi)分離血清，置于-30 °C保存待檢。 內(nèi)毒素檢測(cè)采用鱟試驗(yàn)三肽基質(zhì)顯色法，試劑購自上海伊華臨床醫(yī)學(xué)科技公司。同時(shí)用ELISA法檢測(cè)IL-4、IL-18，試劑購自美國Sigma公司，ALT等指標(biāo)由本院生化室檢測(cè)。用ELISA法檢測(cè)甲、乙、丙、丁、戊型肝炎病毒學(xué)標(biāo)志，均為單純HBV現(xiàn)癥感染。病程進(jìn)入緩解期時(shí)，抽血再次檢測(cè)上述指標(biāo)。 健康對(duì)照也同法檢測(cè)相同指標(biāo)。 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 兩組間均數(shù)比較用t檢驗(yàn)，比較兩組間相關(guān)性用直線相關(guān)分析。 2 結(jié)果 2.1 健康對(duì)照與慢性乙型肝炎患者病程中血清 LPS、IL-4、IL-18、ALT水平變化見表1. 表1 慢乙肝患者病程中血清四項(xiàng)指標(biāo)檢測(cè)值 組別
2.2 相關(guān)性分析 活動(dòng)期：LPS與IL-4、IL-18均呈正相關(guān)（r =0.718、0.883，P <0.01）， IL-4與IL-18也呈正相關(guān)（r =0.854，P <0.01）。 3 討論 肝病時(shí)，由于肝臟的屏障功能有輕重不等的損傷，使腸源性內(nèi)毒素滅活不全，故出現(xiàn)不同程度的內(nèi)毒素血癥[2]。 IL-18是新發(fā)現(xiàn)的一種炎性細(xì)胞因子，可由多種細(xì)胞分泌，但主要由激活的單核巨噬細(xì)胞、肝kupffer細(xì)胞等產(chǎn)生，具有介導(dǎo)炎性損傷、免疫調(diào)節(jié)，抗病毒等多種生物學(xué)功能[3,4]。在炎癥反應(yīng)中，IL-18 mRNA以單核巨噬細(xì)胞表達(dá)為主，LPS可導(dǎo)致IL-18 mRNA在外周血單個(gè)核細(xì)胞中的表達(dá)顯著增加[5]。 HBV、HCV等病毒感染，內(nèi)毒素刺激，均可激活宿主巨噬細(xì)胞產(chǎn)生更多成熟的IL-18[1]。本文發(fā)現(xiàn)隨肝臟炎癥壞死程度不一升高不同. IL-18與IL-12相似，可激活Th1細(xì)胞，增強(qiáng)細(xì)胞免疫功能，誘生IFN-g，還活NK細(xì)胞，增強(qiáng)其靶細(xì)胞殺傷作用，促進(jìn)對(duì)HBV清除，在清除病毒過程中，同時(shí)可引起組織免疫損傷，加重疾病發(fā)展[6-8]。 IL-18是誘導(dǎo)LPS肝損害的重要遞質(zhì)[9]， 內(nèi)毒素可激活巨噬細(xì)胞產(chǎn)生更多IL-18，二者互為因果導(dǎo)致慢性乙型肝炎轉(zhuǎn)為重型肝炎。 IL-4為Th2細(xì)胞因子，在IL-4產(chǎn)生增多，Th2促進(jìn)體液免疫占優(yōu)勢(shì)時(shí)，乙肝易慢性化[10]。IL-4也是炎癥修復(fù)因子，在肝炎病變中，有炎癥因子IL-18被大量激活，同時(shí)炎癥修復(fù)因子也被激活。因此本文結(jié)果顯示慢性乙型肝炎活動(dòng)期LPS、IL-4和IL-18均明顯升高，其變化呈顯著正相關(guān)，三者可相互調(diào)節(jié)，共同參與發(fā)病。 本研究還表明，經(jīng)護(hù)肝、支持療法治療后病情好轉(zhuǎn)，隨ALT下降，病程進(jìn)入緩解期，炎癥減輕，病變趨于靜息，LPS、IL-4、IL-18均顯著降低. 部分原因可能與IL-18的抗感染、抗病毒作用有關(guān)，使HBV復(fù)制水平降低。Sakao et al [9]認(rèn)為IL-18在介導(dǎo)LPS肝損害的同時(shí)，還可顯著下調(diào)TNF-a的產(chǎn)生，因此病變減輕。 本研究顯示在慢性乙型肝炎病程中，內(nèi)毒素、IL-4、IL-18的變化及其相互調(diào)節(jié)影響著慢性乙型肝炎的發(fā)病和轉(zhuǎn)歸，IL-18的抗HBV作用值得研究。 4 參考文獻(xiàn) 【1】Chisari FV, Ferrari C. Hepatitis B virus immunopathogenesis. Annu Rev Immunol 1995;13:29-60 【2】Lin RS, Lee FY, Lee SD, Tsai YT, Lin HC, Lu RH, Hsu WC, Huang CC, Wang SS, Lo KJ. Endotoxemia in patients with chroni liver diseases: relationship to severity of liver diseases, presence of esophageal varices, and hyperdynamic circulation. J Hepatol 1995;22:165-172 【3】Dinarello CA. Interleukin-18. Methods 1999;19:121-132 【4】Tominaga K, Yoshimoto T, Torigoe K, Kurimoto M, Matsui K, Hada T, Okamura H, Nakanishi K. IL-12 synergizes with IL- 18 or IL-lb for IFN-gamma production from human T cells.Into Immunol 2000; 12:151-160 【5】Klein SA, Ottmann OG, Ballas K, Dobmeyer TS, Pape M, Weidmann E, Hoelzer D, Kalina U. Quantification of human interleukin 18 mRNA expression by competitive reverse transcriptase polymerase chain reaction. Cytokine 1999;11:451-458 【7】Guidotti LG, Ishikawa T, Hobbs MV, Matzke B, Schreiber R, Chisari FV. Intracellular inactivation of the hepatitis B virus by cytotoxic T lymphocytes. Immunity 1996;4:25-36 【8】Penna A, Del Prete G, Cavalli A, Bertoletti A, D'Alios MM, Sorrentino R, D扐mato M, Boni C, Pilli M, Fiaccadori F, Ferrari C. Predominant T-helper 1 cytokine profile of hepatitis B virus nucleocapsid-specific T cells in acute self-limited hepatitis B. Hepatology 1997;25:1022-1027 【9】Sakao Y, Takeda K, Tsutsui H, Kaissho T, Nomura F, Okamuea H, Nakanishi K, Akira S. IL-18-deficient mice are resistant to endotoxin-induced liver injury but highly susceptible to endotoxin shock. Int Immunol 1999;11:471-480 【10】Milich DR. Influence of T-helper cell subsets and crossregulation in hepatitis B virus infection. J Viral Hepat 1997;4(Suppl):248-259 |
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