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筆者在使用科華公司ELISA HBsAg試劑進行血標本檢測時經常發現有多數孔出現陽性、弱陽性的情況，我院規定陽性或弱陽性（OD值≥0.060）或（0.105≤OD值≤0.500）都要重新檢測，第2天重新檢測后陽性率降低。筆者經過仔細的分析、研究和多次的試驗發現產生假陽性的原因，并得到了解決，使結果準確無誤，全年獲得省內質控優秀獎。 clin-lab.com
1.1 材料 體檢病人標本。試劑：科華ELISA HBsAg試劑，批號20050929；儀器：芬蘭產（thermo labsy stems）酶標儀、加樣器。 臨床實驗室 1.2 方法 標本用北京產LDZ5—2離心機離心。離心結束后，加樣、酶免分析儀中，按照HBsAg試劑說明書的要求，進行HBsAg的檢測。離心程序有3個：（1）轉速1800rpm，時間5min；（2）轉速3500rpm，時間10min；（3）轉速3500rpm，時間15min。 臨床實驗室 2 結果 clin-lab.com 標本檢測結果見表1。 臨床實驗室 表1 標本檢測結果（略） 臨床實驗室 3 討論 臨床實驗室 經過鑒定和校準的加樣器和酶免分析儀都處于正常狀態，試驗嚴格按照HBsAg試劑說明書的要求進行，試劑的空白和陰、陽性對照以及室內質控孔OD值都很正常，只有血液標本孔OD值的情況異常，原因在標本的離心和血液的放置時間上。留取檢驗標本之前，先用金標試劑的檢測，檢測的結果全為陰性，在HBsAg的ELISA檢測中，標本的陽性率不應該很高。筆者通過增加標本的離心時間和提高離心速度解決了影響試驗的關鍵問題。當標本在1800rpm離心5min后檢測，每板88份標本中有5～10份出現陽性結果；同一批標本3500rpm離心10min后檢測，每板88份標本中有0～3份陽性。另一批標本在3500rpm離心15min后檢測，每板88份標本中也只有0～3份陽性。試驗結論，把標本徹底離心分離不溶血，就可得到準確的實驗結果。這說明，標本的離心處理好壞直接影響實驗結果的準確性。 臨床實驗室 為了避免ELISA試劑“檢測時假陽性的出現”，為了降低檢測的假陽性率，取得準確的結果，筆者認為可采取下列措施： 臨床實驗室 （1）使用抗凝血標本。 clin-lab.com （2）標本放置10h后再檢測較好，讓血凝塊更好地收縮，讓標本中的非特異性活性物質部分或全部失活，降低非特異性反應所致的假陽性率但需要時間較長。 臨床實驗室 （3）離心標本檢測之前，要加大離心速度（3500rpm），增加離心時間，增加離心時間15min使紅細胞和纖維蛋白完全沉淀、離心完全。 clin-lab.com （4）從事免疫檢查的實驗室工作人員，必須熟悉有關標本收集和處理的基本知識，并嚴格執行。 臨床實驗室 （5）標記酶的選擇標準應包括：活性高、貯存和試驗中穩定較高的特異性、可溶性、標記不喪失活性、無抑制物檢測的方法敏感快捷。 臨床實驗室 （6）嚴格按照說明書操作進行。 clin-lab.com （7）用加樣器加血清或血漿時不得加入紅細胞和纖維蛋白，這物質影響結果。 clin-lab.com （8）溶血標本不能檢驗，應重新抽血。 clin-lab.com （9）冬天抽血后最好放置溫水浴中2h血凝塊收縮后再行離心檢測。 臨床實驗室 （10）加終止液時避免產生氣泡，保證酶標板清潔。 臨床實驗室
文章來自臨床實驗室儀器信息網(www.Clin-Lab.Com) - 詳文鏈接：http://www.clin-lab.com/html/linjian/mianyi/201004/25-19300.html |
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