Hepa-IC XG003
檢測肝細胞癌(HCC)中鱗狀細胞癌抗原(SCCA)變異體免疫復(fù)合物的ELISA試劑盒
肝細胞癌 (HCC) 是當今世界上最為常見的惡性腫瘤之一, 其發(fā)生率在各種癌癥中位居第四. 它的預(yù)后非常差, 在診斷后的五年中存活率還不到5％.由于缺乏足夠的高特異性和高敏感性的生物學(xué)標志物來清楚區(qū)分肝細胞癌和其它受損肝臟，肝細胞癌的早期診斷還相當困難. 甲胎蛋白(AFP)是現(xiàn)在最普遍用于診斷肝細胞癌的血清學(xué)標志物,在大多數(shù)肝癌患者的血清中AFP水平有顯著升高(30-60％),但特異性較低(70-80%). 鱗狀細胞癌抗原 (SCCA)變異體是在肝臟外科手術(shù)切除的肝細胞腫瘤中發(fā)現(xiàn)的一種新型標志物,利用其抗體(Hepa-Ab)(1)的免疫組化技術(shù)(FIG.1),在正常的肝臟中檢測不到這種標志物,而在HCC患者的血清中，SCCA變異體則相對于健康人群以70%的敏感性和100％的特異性以游離免疫復(fù)合物(SCCA-IC)的形式被檢測出來.Hepa-IC是專為檢測肝細胞癌患者血清中的SCCA變異體而設(shè)計的一種敏感性和特異性均較高的試劑盒(2, 3).
在Hepa-IC的檢測中，以健康人肝臟作為陰性對照(<120AU/ML)(其表達的SCCA-IC濃度作為標準參照),大多數(shù)(70％)肝細胞癌樣本呈陽性反應(yīng) (mean±SD=2568.5±6796.3AU/ML)(FIG.2)，在26％的肝硬化患者中檢測到SCCA-IC，但其水平較低(mean ± SD =147.5±348.3AU/ML),而在慢性丙肝患者的樣方中,有18％的病人檢測到該種免疫復(fù)合物，但其水平非常低(mean± SD =39.5±89.7AU/ML).在AFP檢測中未發(fā)現(xiàn)此種相關(guān)性:迄今統(tǒng)計的42%的HCC患者中AFP水平有顯著升高(>20ng/ml),在分別用20ng/ml和100ng/ml的AFP作為排除閾值時,分別有96%或80％的HCC患者對一種標志物呈陽性反應(yīng).FIG.3比較了三種肝病患者和正常人對照組的SCCA-IC和AFP水平檢測的靈敏性、特異性、陽性預(yù)期值(PPV)及陰性預(yù)期值(NPV).
FIG.1:免疫組化技術(shù)顯示用抗SCCA變異體抗體著色后肝細胞癌(HCC)結(jié)節(jié)的外觀
FIG.2:利用Hepa-IC ELISA試劑盒檢測SCCA變異體和AFP分別在肝細胞癌HCC(n=60)、肝硬化CR(CR,n=60)、慢性肝炎CH(CH,n=60) 患者以及正常對照組中的血清水平
FIG.3:顯示在患有肝臟疾病的患者和正常對照組中利用SCCA-IC和AFP檢測在敏感性、特異性、陽性預(yù)期值和陰性預(yù)期值的對照.
規(guī)格
成份:
XG003-PL 多條帶化驗板: 96孔板上用親和純化的兔抗SCCA抗體預(yù)包被
XG003-IC SCCA-IC標準液：純化的人SCCA-IC標準液
XG003-EA第二抗體：酶聯(lián)二抗
XG003-CH Chromogen:顯色劑
G003-SB酶的底物溶液
XG003-DB稀釋緩沖液
XG003-WB清洗緩沖液
參考文獻
1、Pontisso P et al. (2004), Br. J. Cancer, 90(4):833-837
2、Beneduce L et al. (2004), J. Hepatol, 40 (suppl.1):77
3、Beneduce L et al. (2004), Digestive and Liver Disease, 36:A2-A3
所需儀器:
微孔板清洗裝置和酶標儀
簡要使用程序
標準曲線和標本:每孔加100μl的XG003-IC標準液(從250AU/ml連續(xù)稀釋直濃度為15.6AU/ml)及稀釋8倍的樣品溶液，以每孔加100μl的XG003-DB稀釋液作為空白。在室溫下孵育1小時，用XG003-WB清洗緩沖液沖洗6次。
第二抗體:每孔加100 μl的XG003-EA酶聯(lián)抗體在室溫下孵育1小時，用XG003-WB洗液漂洗6次。
ABTS 酶作用底物溶液:每孔加200μl新鮮配制好的ABTS底物溶液，置暗處使酶和底物反應(yīng)顯色，并用ELISA酶標儀檢測每孔在405nm處的OD值。
FIG.4:底物孵育1小時后SCCA-IC標準曲線的線性范圍
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